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血清中布洛芬药物检测的快速萃取方法(CommaSep® SLE)

2019-08-02 11:16:19
逗点生物
215
最后编辑:逗点生物 于 2019-08-02 14:28:13

SLE 液液萃取柱

本应用为将 CommaSep® SLE 1 mL(Cat.No.COSLE1CC)的液液萃取柱,应用于血清中布洛芬药物的快速提取和定量,流程如图 1 所示。


一、样品提取

将血清样品用 1 % 的甲酸 (1:1,v/v) 稀释并混匀,使样品最终的 pH 在 3.2 左右。取一部分空白血清备用;剩下的空白血清加入一定体积的布洛芬储备液,配制成浓度为 10 mg/L 的布洛芬加标血清。

二、SLE 柱净化

1) 上样: 向 SLE 柱中加入 1 mL 预处理的样品,加负压或正压启动流速 (5-15 秒 ),然后让样品吸附于填料中约 5 min。
2) 洗脱: 向柱中加入 4 mL 甲基叔丁基醚。使溶剂通过重力流出并收集洗脱液,然后再向柱中加入 4mL 的甲基叔丁基醚,收集洗脱液。在收集结束后加适当的正压或负压 (-15" Hg)2 分钟并收集最终洗脱出的溶剂。
3) 重新溶解: 将上述收集的洗脱液于 35 ℃左右的温度低真空下浓缩,再用缓氮气流去除溶剂,使其浓缩至近干。取 1 mL(60:40, v/v) 的水/ 甲醇定容,过 0.22 µm 滤膜,供 HPLC分析。

三、仪器条件

设备:Waters Alliance 2695
色谱柱:Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器:Waters 2487 紫外检测器
检测波长:268 nm
流动相:A:0.1 % 甲酸水溶液 B:乙腈
洗脱方式:等度洗脱,A:B=50:50
柱温:室温
流速:1 mL/min
进样体积:20 µL

四、实验结果

表 1 布洛芬的回收率

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